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En la actualidad&#44; se sabe que la calcificaci&#243;n es un proceso regulado&#44; en el que intervienen diferentes tipos celulares y gran numero de mediadores&#44; tanto pro- como anti-calcificantes&#44; vg&#44; fosfatasa alcalina &#40;FALC&#41;&#44; Cbfa-1&#44; osteocalcina&#44; y anti-calcificantes&#44; como la prote&#237;na de gliadina de matriz &#40;MGP&#41;&#44; osteoprotegerina &#40;OPG&#41; y fetuina-A<span class="elsevierStyleSup">1-3</span>&#46; La respuesta normal de las CMLV es anticalcificante&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En la uremia&#44; sin embargo&#44; debido a diversas causas&#44; como el aumento de las concentraciones de Ca y&#47;o P en el medio&#44; a los mencionados procesos inflamatorios y oxidativos&#44; o simplemente al estr&#233;s por uso prolongado que acompa&#241;a al envejecimiento&#44; este balance se altera a favor de los factores procalcificantes&#46; Las calcificaciones vasculares ur&#233;micas en la capa media de CMLV&#44; afectan principalmente a zonas de matriz extracelular y a la l&#225;mina el&#225;stica&#46; Este tipo de calcificaci&#243;n es la principal y m&#225;s precoz de las calcificaciones ur&#233;micas<span class="elsevierStyleSup">2</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En la actualidad&#44; se considera a la aldosterona como un factor pro-fibr&#243;tico vascular&#46; Este concepto ha encontrado amplia aceptaci&#243;n en la pr&#225;ctica cl&#237;nica&#44; especialmente desde la publicaci&#243;n del estudio RALES<span class="elsevierStyleSup">4</span>&#46; Existen numerosas evidencias de la existencia de receptores de aldosterona en las CMLV&#44; con diferentes implicaciones funcionales<span class="elsevierStyleSup">5&#44; 6</span>&#46; Sin embargo&#44; y a pesar de la evidente relaci&#243;n en el tiempo entre el desarrollo de fibrosis y rigidez vascular y calcificaci&#243;n de los vasos&#44; no se han llevado a cabo estudios que investiguen una posible relaci&#243;n entre ambos fen&#243;menos&#46; Datos antiguos de la literatura suger&#237;an que la aldosterona podr&#237;a participar en el transporte de calcio en las CMLV<span class="elsevierStyleSup">7</span>&#46; Nuestros propios datos indican que la poblaci&#243;n en di&#225;lisis y enfermedad renal avanzada presenta cifras significativamente altas de aldosterona respecto a los individuos normales &#40;Caramelo y cols&#46;&#44; resultados no publicados&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El motivo del presente trabajo ha sido examinar el papel de la aldosterona en la inducci&#243;n de calcificaciones vasculares&#44; en un modelo experimental reconocido&#44; la exposici&#243;n de c&#233;lulas de CMLV a beta-glicerofosfato&#46; Nuestra hip&#243;tesis aborda la posibilidad de que la aldosterona participe en este proceso&#46; Como m&#233;todos&#44; se han empleado&#58;</p><p class="elsevierStylePara">Cultivo primario de CMLV de aorta bovina seg&#250;n el m&#233;todo descrito por Campbell<span class="elsevierStyleSup">8</span>&#46; Las CMLV fueron empleadas entre los pases 2 y 8&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Inducci&#243;n&#160; del&#160; proceso&#160; de&#160; calcificaci&#243;n&#58; Hemos utilizado un m&#233;todo de calcificaci&#243;n estandarizado e implantado en el Laboratorio<span class="elsevierStyleSup">9</span>&#46; El medio de calcificaci&#243;n&#44; cambiado cada 48 h durante 12 d&#237;as&#44; se basa en el beta-glicerofosfato &#40;10 mM&#41; &#40;Sigma-Aldrich&#44; Madrid&#41;&#46; El beta-glicerofosfato act&#250;a como un dador de PO<span class="elsevierStyleInf">4</span><span class="elsevierStyleSup">-3</span> al ser hidrolizado por la fosfatasa alcalina&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Cuantificaci&#243;n&#160; de&#160; la&#160; calcificaci&#243;n mediante acumulaci&#243;n de <span class="elsevierStyleSup">45</span>Ca&#58; Las c&#233;lulas sometidas a proceso de calcificaci&#243;n se incuban en presencia de 0&#44;5 mCi&#47;ml de <span class="elsevierStyleSup">45</span>Ca &#40;GE Healthcare&#44; Barcelona&#41;&#46; La detecci&#243;n de esta acumulaci&#243;n se realiza con l&#237;quido de centelleo UltimaGold &#40;Perkin Elmer&#44; Waltham&#44; MA&#41; y se detectaron en un contador Beckman LS6000TA&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Tinci&#243;n de von Kossa&#58; Para visualizar el proceso de calcificaci&#243;n&#44; las CMLV se fijaron con Merkcofix &#40;Merck KGaA&#44; Darmstadt&#44; Alemania&#41;&#44; se incubaron con 5&#37; nitrato de plata durante 30 minutos en oscuridad y se dejaron expuestas a la luz solar hasta que la tinci&#243;n fuera observable&#46; Las fotos se realizaron con una c&#225;mara digital Nikkon Coolpix 995 sobre un fondo iluminado&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Incubaci&#243;n con aldosterona&#58; Durante todo el proceso calcificante&#44; las CMLV se incubaron con aldosterona o veh&#237;culo agregados al medio&#46; En cada cambio de medio se agreg&#243; aldosterona a la concentraci&#243;n correspondiente&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Datos estad&#237;sticos&#58; Los datos se expresaron como media &#177; error est&#225;ndar de la media&#46; Excepto indicaci&#243;n en contrario&#44; todos los valores corresponden a un m&#237;nimo de 5 experimentos con muestras en triplicado&#46; Las comparaciones se hicieron mediante la prueba t de Student&#44; emparejada o no emparejada y la prueba de ANOVA con test de Scheff&#233;&#46; Un valor de P &#60; 0&#44;05 se consider&#243; significativo&#46; Todos los c&#225;lculos se realizaron con el paquete estad&#237;stico SPSS 10&#46;0&#44; para Windows&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los hallazgos realizados demuestran la validez del modelo en cuanto a acumulaci&#243;n de calcio en forma de cristales von Kossa positivos y <span class="elsevierStyleSup">45</span>Ca&#46; El incremento alcanz&#243; en general cifras superiores a 250&#37;&#46; El resultado experimental con aldosterona demuestra un incremento de captaci&#243;n de <span class="elsevierStyleSup">45</span>Ca significativo&#44; aunque a concentraciones altas de la hormona &#40;fig&#46; 1&#41;&#46; Este incremento result&#243; inhibido en forma masiva &#40;85 &#177; 4&#37; de inhibici&#243;n&#44; p &#60; 0&#44;01&#41; en presencia de espironolactona &#40;10-7 y 10-6 M&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Jaffe y cols&#46;&#44; acaban de referir un resultado similar pero en un modelo extremadamente selectivo&#44; c&#233;lulas calcificantes&#44; no extrapolable a la generalidad de las CMLV<span class="elsevierStyleSup">10</span>&#46; Nuestros resultados indican que la aldosterona potencia la calcificaci&#243;n en CMLV de tipo normal&#44; lo que extiende ampliamente el marco posible de acci&#243;n calcificante de la hormona&#46; De importancia&#44; la marcada inhibici&#243;n por espironolactona indica que se trata de un efecto a nivel del receptor mineralocorticoide&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Si bien es conocido que la aldosterona induce cambios pro-fibr&#243;ticos en la composici&#243;n proteica de la pared arterial<span class="elsevierStyleSup">4</span>&#44; en nuestro conocimiento&#44; excepto en el trabajo de Jaffe y cols&#46;<span class="elsevierStyleSup">10</span>&#44; se desconoc&#237;a que influyera tambi&#233;n en el proceso de calcificaci&#243;n&#46; Si bien las concentraciones a las que hemos detectado el efecto calcificante son elevadas&#44; las interacciones que ocurren in vivo con otros factores pro-calcificantes pueden ser cruciales para que concentraciones m&#225;s bajas de aldosterona act&#250;en como coadyuvante de otros mediadores&#46;</p><p class="elsevierStylePara">La existencia de calcificaciones extra&#243;seas en pacientes con hiperaldosteronismo de comienzo temprano en la infancia&#44; como los s&#237;ndromes de Bartter y Gitelman&#44; son otro posible ejemplo donde la relaci&#243;n hiperaldosteronismocalcificaci&#243;n puede tener un papel hasta ahora no sospechado<span class="elsevierStyleSup">11&#44; 12</span>&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En conjunto&#44; el presente trabajo aporta nuevos datos en cuanto a los factores que intervienen en la calcificaci&#243;n vascular&#46; No se puede minimizar el inter&#233;s terap&#233;utico potencial de estos resultados al emplear antagonistas aldoster&#243;nicos&#46; De comprobarse que estos act&#250;an sobre el proceso de calcificaci&#243;n vascular&#44; podr&#237;an agregarse una nueva herramienta terap&#233;utica a las ya disponibles para el control de las calcificaciones&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><a href="grande&#47;511127&#95;figura1&#46;jpg" class="elsevierStyleCrossRefs"><img src="511127_figura1.jpg"></img></a></p><p class="elsevierStylePara">Figura 1&#46; </p>"
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Vol. 28. Núm. 2.abril 2008
Páginas 123-238
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DOI:
La aldosterona aumenta la calcificación vascular in vitro
Aldosterone increases vascular calcification in in vitro studies
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A. J.. de Solísa, F. R.. González-Pachecoa, J. J. P. Deuderoa, F.. Neriaa, O.. Calabiaa, R.. Fernández-Sáncheza, C.. Carameloa
a Laboratorio de Nefrología-Hipertensión, Fundación Jiménez Díaz-Capio. Universidad Autónoma de Madrid. Instituto Reina Sofía de Investigación Nefrológica., Madrid, Madrid, España,
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