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Sin embargo&#44; la determinaci&#243;n de esta hormona no es sencilla y est&#225; sometida a numerosa variabilidad<span class="elsevierStyleSup">32-34</span>&#46; Adem&#225;s los m&#233;todos para procesar las muestras de PTH no est&#225;n estandarizados&#44; hecho que podr&#237;a ser una fuente importante de variabilidad pre-anal&#237;tica<span class="elsevierStyleBold">&#46;</span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">OBJETIVO DEL ESTUDIO&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">Analizar la variabilidad en los resultados de la determinaci&#243;n de la PTH-i comparando distintas formas de procesar la misma muestra de plasma tratado con EDTA en pacientes con enfermedad renal cr&#243;nica &#40;ERC&#41; en distintos estadios evolutivos&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">MATERIAL Y M&#201;TODOS</a></span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs"></a></span>En nuestro estudio&#44; se han analizado 294 muestras correspondientes a 49 pacientes con Enfermedad Renal Cr&#243;nica en distintos estadios evolutivos&#44; 18 de ellos procedentes de la Consulta de Trasplante Renal &#40;36&#46;7&#37;&#41; y 31 del programa de Hemodi&#225;lisis Cr&#243;nica de nuestro Centro &#40;63&#46;3&#37;&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Todas las muestras se han extra&#237;do por la ma&#241;ana &#40;entre las 8&#58;00 h-9&#58;00 horas&#41; tras un ayuno de al menos 8 horas y pre-di&#225;lisis en los pacientes en tratamiento sustitutivo renal&#46; Las extracciones se han realizado en la Unidad de Hemodi&#225;lisis de nuestro Hospital&#46; De cada paciente se han obtenido 3 tubos de EDTA&#58; dos de 5 ml y uno de 10 ml&#46; Inmediatamente despu&#233;s de la extracci&#243;n&#44; han sido enviados en nevera al Servicio de Medicina Nuclear&#44; donde cada uno se ha procesado de manera distinta&#44; tal como se explica a continuaci&#243;n&#58;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">1&#46;- Grupo de Referencia o Grupo 1 &#40;tubo EDTA de 5 ml&#41;&#58; </span></p><p class="elsevierStylePara">- Extracci&#243;n muestra &#40;y r&#225;pidamente derivaci&#243;n al Servicio de Medicina Nuclear en nevera&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Centrifugaci&#243;n en refrigeraci&#243;n&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Separaci&#243;n y congelaci&#243;n inmediata&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">2&#46;- Grupo 2 &#40;tubo de EDTA de 10 ml&#41;&#58;</span></p><p class="elsevierStylePara">- Extracci&#243;n muestra&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Dejar a temperatura ambiente 1 hora&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Centrifugaci&#243;n normal</p><p class="elsevierStylePara">- Separaci&#243;n de 3 tubos&#58;</p><p class="elsevierStylePara">o 1 tubo se congela directamente&#46;</p><p class="elsevierStylePara">o Separar 1 tubo en la nevera durante 8 horas y despu&#233;s se congela&#46;</p><p class="elsevierStylePara">o Separar 1 tubo en la nevera durante &#62; 24 horas y despu&#233;s congelar&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">3&#46;- Grupo 3 &#40;Tubo de EDTA de 5 ml&#41;&#58;</span></p><p class="elsevierStylePara">- Extracci&#243;n de la muestra&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Dejar a temperatura ambiente durante &#62; 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Para ello&#44; primero se ha comprobado la normalidad de la distribuci&#243;n mediante el test de homogeneidad de varianzas y normalidad&#46; Posteriormente&#44; realizamos las comparaciones por pares con el t-test&#44; al que le aplicamos la correcci&#243;n de Bonferroni&#46; El nivel de significaci&#243;n fue establecido con p &#62; 0&#44;05&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">RESULTADOS&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">La edad media de nuestra poblaci&#243;n es de 60&#46;88 &#177; 17&#46;65 a&#241;os&#44; siendo el rango de edad comprendido entre 26 y 90 a&#241;os&#46; De los 49 pacientes incluidos en nuestro estudio&#44; 25 son mujeres y 24 varones&#44; lo cual corresponde al 51 &#37; y 49 &#37; respectivamente&#46; La principal causa de enfermedad renal cr&#243;nica es la no filiada&#44; seguida de la de origen vascular y glomerular&#46; El resto de caracter&#237;sticas descriptivas de nuestra poblaci&#243;n a estudio se muestran en la tabla I&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El grupo de referencia present&#243; una media 202&#46;5 &#177; 199&#46;72 pg&#47;ml&#46; Las medias de PTH-intacta en los distintos grupos analizados&#44; que se muestran en la tabla II&#44; fueron 196 &#177; 203&#46;23 pg&#47;ml&#44; 202&#46;8 &#177; 200&#46;2 pg&#47;ml&#44; 200&#46;06 &#177; 194&#46;87 pg&#47;ml&#44; 204&#46;08 &#177; 204&#46;073 pg&#47;ml&#44; 197&#46;94 &#177; 182&#46;31 pg&#47;ml&#46; Como se puede observar en la figura 3&#44; los resultados son practicamente superponibles&#44; no habiendo encontrado diferencias significativas de los grupos a estudio respecto del grupo de referencia &#40;p&#61;0&#46;87&#44; p&#61;0&#46;99&#44; p&#61;0&#46;95&#44; p&#61;0&#46;96&#44; p&#61;0&#46;90 al comparar con grupos 2a&#44; 2b&#44; 2c&#44; 3a y 3b respectivamente&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">DISCUSI&#211;N&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">La determinaci&#243;n s&#233;rica de la parathormona es dif&#237;cil de cuantificar debido a que es bastante inestable tanto en suero como en sangre<span class="elsevierStyleSup">43-45</span> &#40;Vm 5 minutos&#41;&#46; El m&#233;todo considerado como referencia se basa en centrifugar en refrigeraci&#243;n y congelar la muestra inmediatamente despu&#233;s de su extracci&#243;n&#46; Sin embargo&#44; esta manera de proceder es muy dif&#237;cil de conseguir en la cl&#237;nica diaria&#44; pues la actividad nefrol&#243;gica no se limita al &#225;mbito hospitalario&#46; Habitualmente&#44; las muestras son extra&#237;das en los centros perif&#233;ricos y remitidas posteriormente a los hospitales de referencia para ser analizadas&#46; En algunas ocasiones&#44; estos centros no se encuentran muy pr&#243;ximos a dichos hospitales&#46; La mayor&#237;a de las muestras no son centrifugadas ni separadas en los centros de extracci&#243;n porque no disponen de los medios necesarios para ello&#46; Adem&#225;s&#44; las muestras que son centrifugadas lo son a temperatura ambiente&#46; De todo esto&#44; se deriva la importancia que presenta conocer y reducir al m&#225;ximo la variabilidad en el manejo de las muestras&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Actualmente no hay un m&#233;todo estandarizado sobre el procesamiento de las mismas&#46; Existe controversia sobre la estabilidad de la parathormona en suero o en plasma tratado con EDTA&#46; Hay varios estudios que reflejan que las determinaciones de la PTH en suero son menos estables que las obtenidas a partir de muestras de plasma y de sangre conservadas en tubos tratados con EDTA<span class="elsevierStyleSup">35-42</span><span class="elsevierStyleBold">&#46; </span>Sin embargo&#44; Omar et al<span class="elsevierStyleSup">38</span> en el a&#241;o 2001 observaron que los niveles de PTH en EDTA decrec&#237;an un 14&#46;8&#37; a las 48 horas de permanecer a temperatura ambiente&#46; Adem&#225;s&#44; recientemente Cavalier et al<span class="elsevierStyleSup">42</span> demuestran que no siempre las muestras procesadas en EDTA son m&#225;s estables que en suero&#46; Ellos objetivan que la estabilidad de la PTH tras 24 horas a &#8211;20&#186;C es mayor en suero que en plasma tratado con EDTA&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En casi todos los estudios realizados hasta el momento&#44; se compara suero y EDTA <span class="elsevierStyleSup">35-42</span>&#46; Sin embargo&#44; una de las limitaciones que presenta nuestro estudio es que no se ha establecido un grupo control con suero &#40;citrato&#41;&#46; Por tanto&#44; no podemos valorar las determinaciones de la PTH-i en suero y plasma &#40;EDTA&#41; una vez congeladas a &#8211;20&#186;C ni comparar los resultados con los obtenidos por Cavalier et al&#46; Adem&#225;s&#44; no hemos analizado que pasa m&#225;s all&#225; de las 48 horas a temperatura ambiente para poder comparar los resultados con Omar et al&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los hallazgos obtenidos en este estudio muestran que no existen diferencias significativas entre el grupo de referencia y los diferentes grupos analizados&#46; Se confirma que las muestra de plasma tratado con EDTA son estables y se recomienda su empleo cuando la centrifugaci&#243;n en fr&#237;o y la congelaci&#243;n inmediata son dif&#237;ciles de conseguir&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">CONCLUSION&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">La utilizaci&#243;n de EDTA como conservante en el procesamiento de las muestras anal&#237;ticas para la determinaci&#243;n sangu&#237;nea de PTH permite un mayor tiempo de procesamiento de la misma sin la exigencia de su congelaci&#243;n inmediata&#44; mostrando una m&#237;nima variabilidad en los resultados obtenidos seg&#250;n diferentes formas de procesamiento&#46; Estos resultados pueden ayudar a establecer estrategias log&#237;sticas para el procesamiento de muestras sangu&#237;neas en los pacientes con ERC&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><a href="grande&#47;118127&#95;tabla1&#46;jpg" class="elsevierStyleCrossRefs"><img src="118127_tabla1.gif"></img></a></p><p class="elsevierStylePara">Tabla 1&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><a href="grande&#47;118127&#95;tabla2&#46;jpg" class="elsevierStyleCrossRefs"><img src="118127_tabla2.gif"></img></a></p><p class="elsevierStylePara">Tabla 2&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><a href="grande&#47;118127&#95;figura1&#46;jpg" class="elsevierStyleCrossRefs"><img src="118127_figura1.jpg"></img></a></p><p class="elsevierStylePara">Figura 1&#46; </p>"
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        "resumen" => "<p class="elsevierStylePara">Introducci&#243;n&#58; Las alteraciones del metabolismo &#243;seo-mineral presentan una alta prevalencia en los pacientes con enfermedad renal cr&#243;nica &#40;ERC&#41;&#44; siendo mayor conforme avanza el estadio de enfermedad&#46; El diagn&#243;stico de dichas alteraciones se basa fundamentalmente en la determinaci&#243;n de niveles de hormona paratiroide &#40;PTH-i&#41;&#46; Sin embargo&#44; la determinaci&#243;n de esta hormona no es sencilla y est&#225; sometida a gran variabilidad&#46; Los m&#233;todos para procesar las muestras de PTH-i no est&#225;n estandarizados&#44; hecho que podr&#237;a ser una fuente importante de variabilidad preanal&#237;tica&#46; Objetivo&#58; Analizar la variabilidad en los resultados de la determinaci&#243;n de la PTH-i comparando distintas formas de procesar la misma muestra de plasma tratado con&#225;cido etilendiaminotetraac&#233;tico &#40;EDTA&#41; en pacientes con ERC&#46; Material y m&#233;todos&#58; Se han analizado 294 muestras&#44; correspondientes a 49 pacientes con ERC&#44; 18 procedentes de la Consulta de Trasplante Renal &#40;36&#44;7&#37;&#41; y 31 del programa de Hemodi&#225;lisis Cr&#243;nica de nuestro Centro &#40;63&#44;3&#37;&#41;&#46; Se ha procesado la misma muestra de cada uno de nuestros pacientes de seis maneras distintas&#44; comparando las medias entre el grupo de referencia o gold standard y los otros grupos a estudio&#46; Las muestras se procesaron con diferentes condiciones de temperatura y tiempo antes de ser congeladas&#44; constituyendo seis grupos&#58; centrifugaci&#243;n y congelaci&#243;n inmediata &#40;grupo 1&#44; de referencia&#41;&#59; muestra a temperatura ambiente una hora&#44; centrifugaci&#243;n y mantenimiento en nevera &#40;2-8 &#186;C&#41; durante 0&#44; 8 o 24 horas &#40;grupos 2 A&#44; 2B y 2C&#44; respectivamente&#41;&#59; mantenimiento de sangre a temperatura ambiente 3 horas&#44; mantenimiento en nevera &#40;2-8 &#186;C&#41; durante 0 y 8 horas &#40;grupos 3A y 3B&#41;&#46; La PTH-i se ha determinado mediante Inmunoradiometria &#40;IRMA Total Intact Scantibodies assay&#41;&#46; Se ha realizado el test de homogeneidad de varianzas y normalidad&#44; y depu&#233;s comparaciones por pares con el t-test con la correcci&#243;n de Bonferroni&#46; Resultados&#58; La PTH-intacta media en el grupo de referencia fue 202&#44;5 &#177; 199&#44;72 pg&#47;ml&#46; Las medias de PTH-intacta en distintos grupos analizados fueron 196 &#177; 203&#44;23 pg&#47;ml&#44; 202&#44;8 &#177; 200&#44;2 pg&#47;ml&#44; 200&#44;06 &#177; 194&#44;87 pg&#47;ml&#44; 204&#44;08 &#177; 204&#44;073 pg&#47;ml&#44; 197&#44;94 &#177; 182&#44;31 pg&#47;ml&#46; Los resultados fueron pr&#225;cticamente superponibles&#44; no encontrando diferencias significativas respecto al grupo de referencia &#40;p &#61; 0&#44;87&#44; p &#61; 0&#44;99&#44; p &#61; 0&#44;95&#44; p &#61; 0&#44;96&#44; p &#61; 0&#44;90 al comparar con grupos 2A&#44; 2B&#44; 2C&#44; 3A y 3B&#44; respectivamente&#41;&#46; Conclusiones&#58; La utilizaci&#243;n de EDTA como conservante en el procesamiento de las muestras anal&#237;ticas para la determinaci&#243;n sangu&#237;nea de PTH-i permite un mayor tiempo de procesamiento de la misma&#44; sin la exigencia de su congelaci&#243;n inmediata&#44; mostrando una m&#237;nima variabilidad en los resultados obtenidos seg&#250;n diferentes formas de procesamiento&#46; Estos resultados pueden ayudar a establecer estrategias log&#237;sticas para el procesamiento de muestras sangu&#237;neas en los pacientes con ERC&#46;</p>"
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        "resumen" => "<p class="elsevierStylePara">Background&#58; The measurement of i-PTH circulating is not easy due to its analytical variablity&#46; Variability that appears in the process that goes from the sample collection to the final result determination&#46; There are several important aspects that can influence within the pre-test variability&#58; type of sample &#40;serum o plasma&#41;&#44; temperature&#44; time elapses from blood extraction to freezing and from freezing to i-PTH quantification&#46; Blood coming from centres far from our laboratory do not always meet the required processing conditions&#46; Our aim was to study the stability of i-PTH with varying conditions of temperature and time until freezing in patients with chronic kidney disease &#40;CKD&#41;&#46; Method&#58; We have analyzed 294 blood samples of 49 patients with chronic kidney disease &#40;18 transplantated patients &#40;36&#46;7&#37;&#41; and 31 patients in haemodyalisis &#40;63&#46;3&#37;&#41;&#41;&#46; The blood samples were collected using tubes treated with ethylenediaminotetraacetic acid &#40;EDTA&#41;&#59; these samples were subjected to different conditions of temperature and time before they were frozen&#44; constituting 6 groups&#58; blood centrifuged and plasma immediately frozen &#40;group A or reference group&#41;&#59; blood maintained 1 hour at room temperature and plasma stored at 2-8 &#186;C during 0&#44; 8 and 24 hours &#40;groups B&#44;C&#44;D&#41;&#59; blood maintained 3 hours at room temperature and plasma stored at 2-8 &#186;C during 0 and 8 hours &#40;groups E&#44;F&#41;&#46; The intact PTH &#40;i-PTH&#41; was measured using the immunoradiometric assay &#40;IRMA Total Intact Scantibodies assay&#41;&#46; We have analyzed the differences between the PTH-i mean values in the referenced groud and the others&#46; We have applied the tests of homogeneity variance and normality and we have perform a comparation by pairs with the t-test including the Bonferroni correction&#46; Results&#58; The mean value of intact- PTH in the referente Group was 202&#46;5&#177;199&#46;72 pg&#47;ml&#46; The means values of intact-PTH in the other groups were 196 &#177; 203&#46;23 pg&#47;ml&#44; 202&#46;8 &#177; 200&#46;2 pg&#47;ml&#44; 200&#46;06 &#177; 194&#46;87 pg&#47;ml&#44; 204&#46;08 &#177; 204&#46;073 pg&#47;ml&#44; 197&#46;94 &#177; 182&#46;31 pg&#47;ml&#46; The results were practically identical for each group&#46; We did not find important differences with respect to the reference group &#40;p &#61; 0&#46;87&#44; p &#61; 0&#44;99&#44; p &#61; 0&#44;95&#44; p &#61; 0&#44;96&#44; p &#61; 0&#44;90 when comparing with groups 2a&#44; 2b&#44; 2c&#44; 3a y 3b&#41;&#46; Conclusions&#58; The use of EDTA maintain the PTH stability during a longer period without the necessity of freezing the samples immediately&#46; These results can help to state strategies to management the samples in patients with ERC&#46;</p>"
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ANÁLISIS DE LA VARIABILIDAD EN LA DETERMINACIÓN DE LA PTH SEGÚN EL MÉTODO EMPLEADO PARA PROCESAR LA MUESTRA
Analysis of variability in determining intact parathyroid hormone (iPTH) according to the method used to process the sample
Ana Isabel Morales Garcíaa, José Luis Górriz Teruela, Mª Carmen Plancha Mansaneta, Verónica Escudero Quesadaa, Luis Manuel Pallardó Mateua
a Servicio de Nefrología y Servicio de Medicina Nuclear Hospital Universitario Dr. Peset Valencia, Valencia, España,
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Sin embargo&#44; la determinaci&#243;n de esta hormona no es sencilla y est&#225; sometida a numerosa variabilidad<span class="elsevierStyleSup">32-34</span>&#46; Adem&#225;s los m&#233;todos para procesar las muestras de PTH no est&#225;n estandarizados&#44; hecho que podr&#237;a ser una fuente importante de variabilidad pre-anal&#237;tica<span class="elsevierStyleBold">&#46;</span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">OBJETIVO DEL ESTUDIO&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">Analizar la variabilidad en los resultados de la determinaci&#243;n de la PTH-i comparando distintas formas de procesar la misma muestra de plasma tratado con EDTA en pacientes con enfermedad renal cr&#243;nica &#40;ERC&#41; en distintos estadios evolutivos&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">MATERIAL Y M&#201;TODOS</a></span></p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs"></a></span>En nuestro estudio&#44; se han analizado 294 muestras correspondientes a 49 pacientes con Enfermedad Renal Cr&#243;nica en distintos estadios evolutivos&#44; 18 de ellos procedentes de la Consulta de Trasplante Renal &#40;36&#46;7&#37;&#41; y 31 del programa de Hemodi&#225;lisis Cr&#243;nica de nuestro Centro &#40;63&#46;3&#37;&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Todas las muestras se han extra&#237;do por la ma&#241;ana &#40;entre las 8&#58;00 h-9&#58;00 horas&#41; tras un ayuno de al menos 8 horas y pre-di&#225;lisis en los pacientes en tratamiento sustitutivo renal&#46; Las extracciones se han realizado en la Unidad de Hemodi&#225;lisis de nuestro Hospital&#46; De cada paciente se han obtenido 3 tubos de EDTA&#58; dos de 5 ml y uno de 10 ml&#46; Inmediatamente despu&#233;s de la extracci&#243;n&#44; han sido enviados en nevera al Servicio de Medicina Nuclear&#44; donde cada uno se ha procesado de manera distinta&#44; tal como se explica a continuaci&#243;n&#58;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">1&#46;- Grupo de Referencia o Grupo 1 &#40;tubo EDTA de 5 ml&#41;&#58; </span></p><p class="elsevierStylePara">- Extracci&#243;n muestra &#40;y r&#225;pidamente derivaci&#243;n al Servicio de Medicina Nuclear en nevera&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Centrifugaci&#243;n en refrigeraci&#243;n&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Separaci&#243;n y congelaci&#243;n inmediata&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">2&#46;- Grupo 2 &#40;tubo de EDTA de 10 ml&#41;&#58;</span></p><p class="elsevierStylePara">- Extracci&#243;n muestra&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Dejar a temperatura ambiente 1 hora&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Centrifugaci&#243;n normal</p><p class="elsevierStylePara">- Separaci&#243;n de 3 tubos&#58;</p><p class="elsevierStylePara">o 1 tubo se congela directamente&#46;</p><p class="elsevierStylePara">o Separar 1 tubo en la nevera durante 8 horas y despu&#233;s se congela&#46;</p><p class="elsevierStylePara">o Separar 1 tubo en la nevera durante &#62; 24 horas y despu&#233;s congelar&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">3&#46;- Grupo 3 &#40;Tubo de EDTA de 5 ml&#41;&#58;</span></p><p class="elsevierStylePara">- Extracci&#243;n de la muestra&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Dejar a temperatura ambiente durante &#62; 3 horas&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Centrifugaci&#243;n normal&#46;</p><p class="elsevierStylePara">- Separaci&#243;n en 2 tubos&#58;</p><p class="elsevierStylePara">o Congelarlo directamente&#46;</p><p class="elsevierStylePara">o Separar 1 tubo en la nevera &#62; 8 horas y despu&#233;s congelarlo&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Las formas de procesamiento de las muestras empleadas en nuestro estudio son las habitualmente aplicadas en nuestro medio&#46; El m&#233;todo anal&#237;tico que se ha empleado para nuestro estudio es el IRMA Total Intact Scantibodies assays &#40;2&#170; generaci&#243;n&#41;&#46; La variabilidad intraensayo que se ha obtenido es menor del 2&#46;5 &#37;&#46; Se ha considerado como referencia o &#8220;gold standard&#8221; al grupo 1&#170;&#44; ya que son las condiciones generales recomendadas para este tipo de muestras independientemente del m&#233;todo o conservante utilizado &#40;EDTA o citrato&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Se ha realizado la comparaci&#243;n dos a dos entre las medias de la PTH en el grupo de referencia y en el resto de grupos&#46; Para ello&#44; primero se ha comprobado la normalidad de la distribuci&#243;n mediante el test de homogeneidad de varianzas y normalidad&#46; Posteriormente&#44; realizamos las comparaciones por pares con el t-test&#44; al que le aplicamos la correcci&#243;n de Bonferroni&#46; El nivel de significaci&#243;n fue establecido con p &#62; 0&#44;05&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">RESULTADOS&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">La edad media de nuestra poblaci&#243;n es de 60&#46;88 &#177; 17&#46;65 a&#241;os&#44; siendo el rango de edad comprendido entre 26 y 90 a&#241;os&#46; De los 49 pacientes incluidos en nuestro estudio&#44; 25 son mujeres y 24 varones&#44; lo cual corresponde al 51 &#37; y 49 &#37; respectivamente&#46; La principal causa de enfermedad renal cr&#243;nica es la no filiada&#44; seguida de la de origen vascular y glomerular&#46; El resto de caracter&#237;sticas descriptivas de nuestra poblaci&#243;n a estudio se muestran en la tabla I&#46;</p><p class="elsevierStylePara">El grupo de referencia present&#243; una media 202&#46;5 &#177; 199&#46;72 pg&#47;ml&#46; Las medias de PTH-intacta en los distintos grupos analizados&#44; que se muestran en la tabla II&#44; fueron 196 &#177; 203&#46;23 pg&#47;ml&#44; 202&#46;8 &#177; 200&#46;2 pg&#47;ml&#44; 200&#46;06 &#177; 194&#46;87 pg&#47;ml&#44; 204&#46;08 &#177; 204&#46;073 pg&#47;ml&#44; 197&#46;94 &#177; 182&#46;31 pg&#47;ml&#46; Como se puede observar en la figura 3&#44; los resultados son practicamente superponibles&#44; no habiendo encontrado diferencias significativas de los grupos a estudio respecto del grupo de referencia &#40;p&#61;0&#46;87&#44; p&#61;0&#46;99&#44; p&#61;0&#46;95&#44; p&#61;0&#46;96&#44; p&#61;0&#46;90 al comparar con grupos 2a&#44; 2b&#44; 2c&#44; 3a y 3b respectivamente&#41;&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">DISCUSI&#211;N&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">La determinaci&#243;n s&#233;rica de la parathormona es dif&#237;cil de cuantificar debido a que es bastante inestable tanto en suero como en sangre<span class="elsevierStyleSup">43-45</span> &#40;Vm 5 minutos&#41;&#46; El m&#233;todo considerado como referencia se basa en centrifugar en refrigeraci&#243;n y congelar la muestra inmediatamente despu&#233;s de su extracci&#243;n&#46; Sin embargo&#44; esta manera de proceder es muy dif&#237;cil de conseguir en la cl&#237;nica diaria&#44; pues la actividad nefrol&#243;gica no se limita al &#225;mbito hospitalario&#46; Habitualmente&#44; las muestras son extra&#237;das en los centros perif&#233;ricos y remitidas posteriormente a los hospitales de referencia para ser analizadas&#46; En algunas ocasiones&#44; estos centros no se encuentran muy pr&#243;ximos a dichos hospitales&#46; La mayor&#237;a de las muestras no son centrifugadas ni separadas en los centros de extracci&#243;n porque no disponen de los medios necesarios para ello&#46; Adem&#225;s&#44; las muestras que son centrifugadas lo son a temperatura ambiente&#46; De todo esto&#44; se deriva la importancia que presenta conocer y reducir al m&#225;ximo la variabilidad en el manejo de las muestras&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Actualmente no hay un m&#233;todo estandarizado sobre el procesamiento de las mismas&#46; Existe controversia sobre la estabilidad de la parathormona en suero o en plasma tratado con EDTA&#46; Hay varios estudios que reflejan que las determinaciones de la PTH en suero son menos estables que las obtenidas a partir de muestras de plasma y de sangre conservadas en tubos tratados con EDTA<span class="elsevierStyleSup">35-42</span><span class="elsevierStyleBold">&#46; </span>Sin embargo&#44; Omar et al<span class="elsevierStyleSup">38</span> en el a&#241;o 2001 observaron que los niveles de PTH en EDTA decrec&#237;an un 14&#46;8&#37; a las 48 horas de permanecer a temperatura ambiente&#46; Adem&#225;s&#44; recientemente Cavalier et al<span class="elsevierStyleSup">42</span> demuestran que no siempre las muestras procesadas en EDTA son m&#225;s estables que en suero&#46; Ellos objetivan que la estabilidad de la PTH tras 24 horas a &#8211;20&#186;C es mayor en suero que en plasma tratado con EDTA&#46;</p><p class="elsevierStylePara">En casi todos los estudios realizados hasta el momento&#44; se compara suero y EDTA <span class="elsevierStyleSup">35-42</span>&#46; Sin embargo&#44; una de las limitaciones que presenta nuestro estudio es que no se ha establecido un grupo control con suero &#40;citrato&#41;&#46; Por tanto&#44; no podemos valorar las determinaciones de la PTH-i en suero y plasma &#40;EDTA&#41; una vez congeladas a &#8211;20&#186;C ni comparar los resultados con los obtenidos por Cavalier et al&#46; Adem&#225;s&#44; no hemos analizado que pasa m&#225;s all&#225; de las 48 horas a temperatura ambiente para poder comparar los resultados con Omar et al&#46;</p><p class="elsevierStylePara">Los hallazgos obtenidos en este estudio muestran que no existen diferencias significativas entre el grupo de referencia y los diferentes grupos analizados&#46; Se confirma que las muestra de plasma tratado con EDTA son estables y se recomienda su empleo cuando la centrifugaci&#243;n en fr&#237;o y la congelaci&#243;n inmediata son dif&#237;ciles de conseguir&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><a class="elsevierStyleCrossRefs">CONCLUSION&#58;</a></span></p><p class="elsevierStylePara">La utilizaci&#243;n de EDTA como conservante en el procesamiento de las muestras anal&#237;ticas para la determinaci&#243;n sangu&#237;nea de PTH permite un mayor tiempo de procesamiento de la misma sin la exigencia de su congelaci&#243;n inmediata&#44; mostrando una m&#237;nima variabilidad en los resultados obtenidos seg&#250;n diferentes formas de procesamiento&#46; Estos resultados pueden ayudar a establecer estrategias log&#237;sticas para el procesamiento de muestras sangu&#237;neas en los pacientes con ERC&#46;</p><p class="elsevierStylePara"><a href="grande&#47;118127&#95;tabla1&#46;jpg" class="elsevierStyleCrossRefs"><img src="118127_tabla1.gif"></img></a></p><p class="elsevierStylePara">Tabla 1&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><a href="grande&#47;118127&#95;tabla2&#46;jpg" class="elsevierStyleCrossRefs"><img src="118127_tabla2.gif"></img></a></p><p class="elsevierStylePara">Tabla 2&#46; </p><p class="elsevierStylePara"><a href="grande&#47;118127&#95;figura1&#46;jpg" class="elsevierStyleCrossRefs"><img src="118127_figura1.jpg"></img></a></p><p class="elsevierStylePara">Figura 1&#46; </p>"
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        "resumen" => "<p class="elsevierStylePara">Background&#58; The measurement of i-PTH circulating is not easy due to its analytical variablity&#46; Variability that appears in the process that goes from the sample collection to the final result determination&#46; There are several important aspects that can influence within the pre-test variability&#58; type of sample &#40;serum o plasma&#41;&#44; temperature&#44; time elapses from blood extraction to freezing and from freezing to i-PTH quantification&#46; Blood coming from centres far from our laboratory do not always meet the required processing conditions&#46; Our aim was to study the stability of i-PTH with varying conditions of temperature and time until freezing in patients with chronic kidney disease &#40;CKD&#41;&#46; Method&#58; We have analyzed 294 blood samples of 49 patients with chronic kidney disease &#40;18 transplantated patients &#40;36&#46;7&#37;&#41; and 31 patients in haemodyalisis &#40;63&#46;3&#37;&#41;&#41;&#46; The blood samples were collected using tubes treated with ethylenediaminotetraacetic acid &#40;EDTA&#41;&#59; these samples were subjected to different conditions of temperature and time before they were frozen&#44; constituting 6 groups&#58; blood centrifuged and plasma immediately frozen &#40;group A or reference group&#41;&#59; blood maintained 1 hour at room temperature and plasma stored at 2-8 &#186;C during 0&#44; 8 and 24 hours &#40;groups B&#44;C&#44;D&#41;&#59; blood maintained 3 hours at room temperature and plasma stored at 2-8 &#186;C during 0 and 8 hours &#40;groups E&#44;F&#41;&#46; The intact PTH &#40;i-PTH&#41; was measured using the immunoradiometric assay &#40;IRMA Total Intact Scantibodies assay&#41;&#46; We have analyzed the differences between the PTH-i mean values in the referenced groud and the others&#46; We have applied the tests of homogeneity variance and normality and we have perform a comparation by pairs with the t-test including the Bonferroni correction&#46; Results&#58; The mean value of intact- PTH in the referente Group was 202&#46;5&#177;199&#46;72 pg&#47;ml&#46; The means values of intact-PTH in the other groups were 196 &#177; 203&#46;23 pg&#47;ml&#44; 202&#46;8 &#177; 200&#46;2 pg&#47;ml&#44; 200&#46;06 &#177; 194&#46;87 pg&#47;ml&#44; 204&#46;08 &#177; 204&#46;073 pg&#47;ml&#44; 197&#46;94 &#177; 182&#46;31 pg&#47;ml&#46; The results were practically identical for each group&#46; We did not find important differences with respect to the reference group &#40;p &#61; 0&#46;87&#44; p &#61; 0&#44;99&#44; p &#61; 0&#44;95&#44; p &#61; 0&#44;96&#44; p &#61; 0&#44;90 when comparing with groups 2a&#44; 2b&#44; 2c&#44; 3a y 3b&#41;&#46; Conclusions&#58; The use of EDTA maintain the PTH stability during a longer period without the necessity of freezing the samples immediately&#46; These results can help to state strategies to management the samples in patients with ERC&#46;</p>"
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Información del artículo
ISSN: 02116995
Idioma original: Español
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