Diagnóstico molecular de la Poliquistosis Renal Autosómica Dominante en la Comunidad Autónoma de Canarias
Molecular diagnosis of adult dominant polycystic kidney disease in the Canary Islands
M.J. Torres Galván*, J.C. Rodríguez Pérez*¿, C.R. Hernández Socorro¿, A. Anabitarte*, A. Caballero*, C. Vázquez§, M. Fernández-Burriel§, P. Pérez Borg
Leído
10435
Vecesse ha leído el artículo
2451
Total PDF
7984
Total HTML
Compartir estadísticas
array:21 [ "pii" => "X0211699506020582" "issn" => "02116995" "doi" => " " "estado" => "S300" "fechaPublicacion" => "2006-12-01" "documento" => "article" "licencia" => "http://www.elsevier.com/open-access/userlicense/1.0/" "subdocumento" => "fla" "cita" => "Nefrologia. 2006;26:666-72" "abierto" => array:3 [ "ES" => true "ES2" => true "LATM" => true ] "gratuito" => true "lecturas" => array:2 [ "total" => 6080 "formatos" => array:3 [ "EPUB" => 244 "HTML" => 5153 "PDF" => 683 ] ] "Traduccion" => array:1 [ "en" => array:17 [ "pii" => "X201325140602058X" "issn" => "20132514" "doi" => " " "estado" => "S300" "fechaPublicacion" => "2006-12-01" "documento" => "article" "licencia" => "http://www.elsevier.com/open-access/userlicense/1.0/" "subdocumento" => "fla" "cita" => "Nefrologia (English Version). 2006;26:666-72" "abierto" => array:3 [ "ES" => true "ES2" => true "LATM" => true ] "gratuito" => true "lecturas" => array:2 [ "total" => 2313 "formatos" => array:3 [ "EPUB" => 205 "HTML" => 1648 "PDF" => 460 ] ] "en" => array:8 [ "idiomaDefecto" => true "titulo" => "Molecular diagnosis of adult dominant polycystic kidney disease in the Canary Islands" "tienePdf" => "en" "tieneTextoCompleto" => 0 "paginas" => array:1 [ 0 => array:2 [ "paginaInicial" => "666" "paginaFinal" => "672" ] ] "titulosAlternativos" => array:1 [ "es" => array:1 [ "titulo" => "Diagnóstico molecular de la Poliquistosis Renal Autosómica Dominante en la Comunidad Autónoma de Canarias" ] ] "contienePdf" => array:1 [ "en" => true ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "M.J. Torres Galván*, J.C. Rodríguez Pérez*¿, C.R. Hernández Socorro¿, A. Anabitarte*, A. Caballero*, C. Vázquez§, M. Fernández-Burriel§, P. Pérez Borg" "autores" => array:1 [ 0 => array:1 [ "nombre" => "M.J. Torres Galván*, J.C. Rodríguez Pérez*¿, C.R. Hernández Socorro¿, A. Anabitarte*, A. Caballero*, C. Vázquez§, M. Fernández-Burriel§, P. Pérez Borg" ] ] ] ] ] "idiomaDefecto" => "en" "Traduccion" => array:1 [ "es" => array:9 [ "pii" => "X0211699506020582" "doi" => " " "estado" => "S300" "subdocumento" => "" "abierto" => array:3 [ "ES" => true "ES2" => true "LATM" => true ] "gratuito" => true "lecturas" => array:1 [ "total" => 0 ] "idiomaDefecto" => "es" "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/X0211699506020582?idApp=UINPBA000064" ] ] "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/X201325140602058X?idApp=UINPBA000064" "url" => "/20132514/0000002600000006/v0_201502091552/X201325140602058X/v0_201502091552/en/main.assets" ] ] "itemSiguiente" => array:17 [ "pii" => "X0211699506020621" "issn" => "02116995" "doi" => " " "estado" => "S300" "fechaPublicacion" => "2006-12-01" "documento" => "article" "licencia" => "http://www.elsevier.com/open-access/userlicense/1.0/" "subdocumento" => "fla" "cita" => "Nefrologia. 2006;26:673-8" "abierto" => array:3 [ "ES" => true "ES2" => true "LATM" => true ] "gratuito" => true "lecturas" => array:2 [ "total" => 5789 "formatos" => array:3 [ "EPUB" => 233 "HTML" => 4983 "PDF" => 573 ] ] "es" => array:10 [ "idiomaDefecto" => true "titulo" => "Helicobacter pylori no contribuye al déficit de hierro de los pacientes en hemodiálisis" "tienePdf" => "es" "tieneTextoCompleto" => "es" "tieneResumen" => "es" "paginas" => array:1 [ 0 => array:2 [ "paginaInicial" => "673" "paginaFinal" => "678" ] ] "contieneResumen" => array:1 [ "es" => true ] "contieneTextoCompleto" => array:1 [ "es" => true ] "contienePdf" => array:1 [ "es" => true ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "T.López Nefrologia Corporació sanitaria Parc Tauli, J.Almirall Nefrologia Corporació Sanitaria Parc Tauli, X.Calvet Digestologia Corporació Sanitaria" "autores" => array:1 [ 0 => array:1 [ "nombre" => "T.López Nefrologia Corporació sanitaria Parc Tauli, J.Almirall Nefrologia Corporació Sanitaria Parc Tauli, X.Calvet Digestologia Corporació Sanitaria" ] ] ] ] ] "idiomaDefecto" => "es" "Traduccion" => array:1 [ "en" => array:9 [ "pii" => "X2013251406020629" "doi" => " " "estado" => "S300" "subdocumento" => "" "abierto" => array:3 [ "ES" => true "ES2" => true "LATM" => true ] "gratuito" => true "lecturas" => array:1 [ "total" => 0 ] "idiomaDefecto" => "en" "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/X2013251406020629?idApp=UINPBA000064" ] ] "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/X0211699506020621?idApp=UINPBA000064" "url" => "/02116995/0000002600000006/v0_201502091327/X0211699506020621/v0_201502091328/es/main.assets" ] "itemAnterior" => array:16 [ "pii" => "X0211699506020441" "issn" => "02116995" "estado" => "S300" "fechaPublicacion" => "2006-12-01" "documento" => "article" "licencia" => "http://www.elsevier.com/open-access/userlicense/1.0/" "subdocumento" => "fla" "cita" => "Nefrologia. 2006;26:658-65" "abierto" => array:3 [ "ES" => true "ES2" => true "LATM" => true ] "gratuito" => true "lecturas" => array:2 [ "total" => 20140 "formatos" => array:3 [ "EPUB" => 292 "HTML" => 14873 "PDF" => 4975 ] ] "es" => array:9 [ "idiomaDefecto" => true "titulo" => "Recomendaciones sobre la utilización de ecuaciones para la estimación del filtrado glomerular en adultos" "tienePdf" => "es" "tieneTextoCompleto" => "es" "paginas" => array:1 [ 0 => array:2 [ "paginaInicial" => "658" "paginaFinal" => "665" ] ] "titulosAlternativos" => array:1 [ "en" => array:1 [ "titulo" => "Recommendations for the use of equations to estimate glomerular filtration rate in adults" ] ] "contieneTextoCompleto" => array:1 [ "es" => true ] "contienePdf" => array:1 [ "es" => true ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "Silvia Gracia Garcia, Rosario Montañés Barmudez, Jordi Bover Sanjuan, Aleix Cases Amenós, Ramon Deulofeu Piquet, Angel Luis Martin de Fran" "autores" => array:1 [ 0 => array:1 [ "nombre" => "Silvia Gracia Garcia, Rosario Montañés Barmudez, Jordi Bover Sanjuan, Aleix Cases Amenós, Ramon Deulofeu Piquet, Angel Luis Martin de Fran" ] ] ] ] ] "idiomaDefecto" => "es" "Traduccion" => array:1 [ "en" => array:8 [ "pii" => "X2013251406020449" "estado" => "S300" "subdocumento" => "" "abierto" => array:3 [ "ES" => true "ES2" => true "LATM" => true ] "gratuito" => true "lecturas" => array:1 [ "total" => 0 ] "idiomaDefecto" => "en" "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/X2013251406020449?idApp=UINPBA000064" ] ] "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/X0211699506020441?idApp=UINPBA000064" "url" => "/02116995/0000002600000006/v0_201502091327/X0211699506020441/v0_201502091328/es/main.assets" ] "es" => array:11 [ "idiomaDefecto" => true "titulo" => "Diagnóstico molecular de la Poliquistosis Renal Autosómica Dominante en la Comunidad Autónoma de Canarias" "tieneTextoCompleto" => true "paginas" => array:1 [ 0 => array:2 [ "paginaInicial" => "666" "paginaFinal" => "672" ] ] "autores" => array:1 [ 0 => array:2 [ "autoresLista" => "M.J. Torres Galván*, J.C. Rodríguez Pérez*¿, C.R. Hernández Socorro¿, A. Anabitarte*, A. Caballero*, C. Vázquez§, M. Fernández-Burriel§, P. Pérez Borg" "autores" => array:1 [ 0 => array:1 [ "nombre" => "M.J. Torres Galván*, J.C. Rodríguez Pérez*¿, C.R. Hernández Socorro¿, A. Anabitarte*, A. Caballero*, C. Vázquez§, M. Fernández-Burriel§, P. Pérez Borg" ] ] ] ] "titulosAlternativos" => array:1 [ "en" => array:1 [ "titulo" => "Molecular diagnosis of adult dominant polycystic kidney disease in the Canary Islands" ] ] "textoCompleto" => "Diagnóstico molecular de la Poliquistosis Renal Autosómica Dominante en la Comunidad Autónoma de Canarias <span class="elsevierStyleSup">1</span> Título corto: Diagnóstico molecular de la PQRAD M.J. Torres Galván <span class="elsevierStyleSup">*</span>, J.C. Rodríguez Pérez <span class="elsevierStyleSup">*¿</span>, C.R. Hernández Socorro <span class="elsevierStyleSup">¿</span>, A. Anabitarte <span class="elsevierStyleSup">*</span>, A. Caballero <span class="elsevierStyleSup">*</span>, C. Vázquez <span class="elsevierStyleSup">§</span>, M. Fernández-Burriel <span class="elsevierStyleSup">§</span>, P. Pérez Borges <span class="elsevierStyleSup">¿</span>, L. Palop <span class="elsevierStyleSup">¿</span>. <p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleSup">*</span>Unidad de Investigación, <span class="elsevierStyleBold"><span class="elsevierStyleSup">¿</span></span>Servicio de Nefrología, <span class="elsevierStyleBold"><span class="elsevierStyleSup">¿</span></span>Servicio de Radiodiagnóstico. Hospital Universitario de Gran Canaria Dr. Negrín.</p><span class="elsevierStyleSup">§</span>Unidad de Genética. Complejo Hospitalario Materno-Insular. <p class="elsevierStylePara">Las Palmas de Gran Canaria.</p><span class="elsevierStyleSup">1</span>Grupo de investigación colaborador <span class="elsevierStyleSup"> </span>de la Asociación para la Investigación e Información sobre las Enfermedades Renales Genéticas y Grupo de trabajo de Enfermedades Renales Hereditarias de la Sociedad Española de Nefrología (Presidenta y Coordinadora, respectivamente: Dra. Roser Torra Balcells). <p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Correspondencia:</span> Dr. José Carlos Rodríguez Pérez</p><p class="elsevierStylePara">Unidad de Investigación</p><p class="elsevierStylePara">Hospital Universitario de Gran Canaria Dr. Negrín</p><p class="elsevierStylePara">Barranco de la Ballena s/n</p><p class="elsevierStylePara">35010 Las Palmas de Gran Canaria</p><p class="elsevierStylePara">E-mail: jrodperd@gobiernodecanarias.org</p>Resumen <p class="elsevierStylePara">La poliquistosis renal autosómica dominante es una enfermedad hereditaria responsable del 6% de los casos de insuficiencia renal terminal en España. En la década de los 90 se identificaron los dos únicos genes relacionados con la enfermedad hasta el momento, en los cromosomas 16 y 4 (PKD1 y PKD2). El diagnóstico de esta enfermedad de desarrollo dependiente de la edad puede realizarse fácilmente mediante ecografía, pero el diagnóstico molecular mediante el análisis de ligamiento ofrece la ventaja de la detección precoz de individuos asintomáticos portadores del defecto genético, con vistas al seguimiento preventivo de estos individuos y al consejo genético.</p><p class="elsevierStylePara">En este trabajo presentamos los resultados del análisis molecular de 30 familias con poliquistosis renal de la provincia de Las Palmas, realizado mediante análisis de ligamiento con dos series de marcadores polimórficos localizados en las inmediaciones de los genes PKD1 (D16S521, KG8, AC2.5, CW2, SM7) y PKD2 (D4S1538, D4S1534, D4S423, D4S414). Los objetivos del trabajo fueron: primero, comprobar el grado de informatividad y, por tanto, la utilidad de estos microsatélites para los estudios familiares de la PQRAD en nuestra población; y segundo, determinar la sensibilidad y especificidad del análisis genético en nuestra población.</p><p class="elsevierStylePara">La mayoría de los marcadores mostró una alta heterocigosidad, comparable a la de otros estudios. Considerar los alelos de los distintos marcadores presentes en un mismo cromosoma conjuntamente, como un haplotipo, aumentó la informatividad de los marcadores y permitió la identificación inequívoca de los datos genéticos en el 97.7% de los pacientes y en el 88.7% de los individuos sanos. La sensibilidad y especificidad del análisis genético fueron del 90.7% (IC 95%: 85.7-95.7) y 86.8% (IC 95%: 80.6-93.0), respectivamente. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Palabras clave:</span> poliquistosis, diagnóstico precoz, consejo genético, microsatélites.</p><span class="elsevierStyleBold"><br></br></span>Summary <p class="elsevierStylePara">Adult Dominant Polycystic Kidney Disease is an hereditary condition responsible for 6% of end-stage renal failure in Spain. Two genes were localized in chromosomes 16 and 4 as related to this age-dependent disease in the 90s (PKD1 and PKD2). The diagnosis can be easily achieved by sonographic study, but molecular analysis by means of linkage analysis has the advantage of an early diagnosis in asymptomatic genetic carriers, with a view to the preventive follow-up of these subjects and genetic counselling.</p><p class="elsevierStylePara">In this paper we present the results of molecular analysis of 30 families with Adult Dominant Polycystic Kidney Disease (all from the province of Las Palmas, Spain), undertaken by linkage analysis with two series of microsatellite markers located within or in the vicinity of PKD1 (D16S521, KG8, AC2.5, CW2, SM7) and PKD2 (D4S1538, D4S1534, D4S423, D4S414) genes. The objectives of the study were: first, to verify the informativeness, and therefore, the usefulness of these markers for family studies in our population; and second, to assess the sensitivity and specificity of the genetic analysis in our population.</p><p class="elsevierStylePara">Most of the markers showed a high heterozigosity, comparable to data in other studies. Considering the alleles of the different markers together in a chromosome as an haplotype increased the informativeness of the markers, and allowed the unequivocal identification of genetic data in 97.7% of patients and 88.7% of healthy subjects. The sensitivity and specificity of the genetic analysis were 90.7% (CI 95%=85.7-95.7) and 86.8% (CI 95%=80.6-93.0), respectively. </p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Key words:</span> polycystic disease, early diagnosis, genetic counselling, microsatellite markers.</p><span class="elsevierStyleBold"><br></br></span>Introducción <p class="elsevierStylePara">La poliquistosis renal autosómica dominante (PQRAD) es una enfermedad hereditaria responsable del 6% de los casos de insuficiencia renal terminal en España<span class="elsevierStyleSup">1</span>. Se trata de una de las enfermedades hereditarias más frecuentes, con una prevalencia que varía entre uno de cada 400 a uno de cada 1000 individuos en población blanca<span class="elsevierStyleSup">2</span>, y un patrón de herencia dominante. Se caracteriza por la formación de múltiples quistes en los riñones, que van deteriorando progresivamente la función renal hasta llegar a la insuficiencia renal terminal. Igualmente, se originan quistes en otros órganos como el hígado, el bazo o el páncreas. Las complicaciones extrarrenales incluyen trastornos gastrointestinales y/o cardiovasculares, siendo las más graves las anomalías de las válvulas cardíacas, la disección de la aorta torácica y el aneurisma intracraneal. Los pacientes ven muy deteriorada su calidad de vida debido a las múltiples complicaciones de la enfermedad. La hipertensión arterial (HTA) afecta al 60% de los pacientes antes de que aparezca la insuficiencia renal<span class="elsevierStyleSup">2</span>. </p><p class="elsevierStylePara">En 1994, el Consorcio Europeo de la Poliquistosis Renal identificó el primer gen relacionado con la PQRAD, denominado PKD1 y localizado en el cromosoma 16<span class="elsevierStyleSup">3</span>. Un segundo gen (PKD2) fue localizado posteriormente en el cromosoma 4<span class="elsevierStyleSup">4,5</span>. En el 85-90% de las familias afectadas la enfermedad está asociada con el gen PKD1, mientras que el 10-15% restante se asocia con el PKD2<span class="elsevierStyleSup">6,7</span>. A pesar de que la enfermedad de los individuos PKD1 y PKD2 presenta los mismos rasgos clínicos generales, existen diferencias en la progresión de la enfermedad y la mortalidad, siendo la enfermedad asociada a PKD1 la más grave y la que comienza a manifestarse antes. </p><p class="elsevierStylePara">Las proteínas codificadas por los genes PKD1 y PKD2 se denominan poliquistina-1 y -2, respectivamente. A día de hoy se sabe que son proteínas de membrana implicadas en la recepción y transducción de señales intracelulares <span class="elsevierStyleSup">8-10</span> en procesos como la proliferación o la apoptosis. Las mutaciones en los genes que codifican a las poliquistinas originan proteínas funcionalmente defectuosas que alteran los procesos mencionados, además de las propiedades de polarización y transporte transcelular de las células epiteliales renales<span class="elsevierStyleSup">11</span>. Esto tiene como resultado el crecimiento incontrolado del tejido y la acumulación de líquido en los quistes que caracteriza a la enfermedad poliquística. </p><p class="elsevierStylePara">El diagnóstico de la PQRAD se realiza habitualmente mediante ecografía. Sin embargo, las pruebas genéticas pueden ser utilizadas si los resultados ecográficos no son concluyentes, como prueba complementaria, o si se requiere un diagnóstico definitivo en una persona menor de 30 años. El diagnóstico molecular no puede predecir el momento de comienzo, la severidad, el tipo de síntomas o el grado de progresión de la enfermedad. Sin embargo, permite una intervención precoz en cuanto al seguimiento y tratamiento de la HTA, infecciones y litiasis, que puede retrasar la aparición de la insuficiencia renal<span class="elsevierStyleSup">12</span>. Otra aplicación importante del diagnóstico molecular es el consejo genético familiar, consistente en informar al individuo afecto sobre la enfermedad, su modo de herencia y los riesgos de transmitirla a su descendencia. La probabilidad de que un individuo poliquístico transmita el gen causante de la enfermedad a un hijo es del 50%. </p><p class="elsevierStylePara">El diagnóstico genético puede realizarse por búsqueda directa de la mutación o de forma indirecta, mediante análisis de ligamiento. El análisis mutacional presenta dificultades debido al gran tamaño y complejidad del gen PKD1, y a la gran cantidad de mutaciones y polimorfismos descritos en dicho gen, que hace difícil distinguir los cambios patogénicos de los neutrales. Con el análisis de ligamiento se estudia la transmisión de padres a hijos de una serie de marcadores polimórficos localizados en el gen de interés o en sus proximidades, lo que permite la identificación de individuos portadores antes de que aparezcan síntomas de la enfermedad. </p><p class="elsevierStylePara">En este trabajo presentamos los resultados del análisis molecular de 30 familias con PQRAD de la provincia de Las Palmas, realizado mediante análisis de ligamiento con marcadores de las regiones cromosómicas donde se localizan los genes PKD1 y PKD2. Los objetivos del trabajo fueron: primero, comprobar el grado de informatividad y, por tanto, la utilidad de estos microsatélites para los estudios familiares de la PQRAD en nuestra población; y segundo determinar la sensibilidad y especificidad del análisis genético con dichos marcadores en nuestra población.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Material y métodos</span></p><span class="elsevierStyleItalic">Familias</span><p class="elsevierStylePara">Se incluyeron en el estudio 30 familias seleccionadas a partir de pacientes con diagnóstico de PQRAD, procedentes del Servicio de Nefrología del Hospital Universitario de Gran Canaria Dr. Negrín (24 familias) y de la Unidad de Genética del Complejo Hospitalario Materno-Insular (6 familias), siendo estos dos hospitales los centros de referencia para la enfermedad en la provincia de Las Palmas. Estas familias aportaron un total de 248 individuos al estudio, de los cuales 116 tenían un diagnóstico previo de PQRAD. Se obtuvo el consentimiento informado de todos los participantes en el estudio antes de su inclusión en el mismo.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><span class="elsevierStyleItalic">Estudio ecográfico</span></span></p><p class="elsevierStylePara">Los criterios de diagnóstico ecográfico consistieron en la existencia de al menos dos quistes (considerando los dos riñones en conjunto) en individuos de menos de 30 años, dos quistes en cada riñón en individuos entre los 30 y los 59 años y cuatro quistes en cada uno en individuos de edad igual o superior a los 60 años<span class="elsevierStyleSup">13</span>. Los sujetos que cumplían estos criterios fueron clasificados como pacientes. Estos criterios han sido acordados por los laboratorios europeos y tienen una sensibilidad de prácticamente el 100% para los pacientes mayores de 30 años o para pacientes más jóvenes con mutaciones en PKD1, y del 67% para pacientes menores de 30 años con mutaciones en PKD2<span class="elsevierStyleSup">14</span>. Todas las ecografías fueron realizadas en la Sección de Ecografía del Servicio de Radiodiagnóstico del Hospital Universitario de Gran Canaria Dr. Negrín por un único ecografista (CRHS), con un ecógrafo doppler color de alta gama, modelo Aplio 80 ¿SSA-770A¿ (Toshiba, Tokio, Japón) con transductor sectorial convex de 3.75 MHz.</p><span class="elsevierStyleItalic">Determinaciones genéticas </span><p class="elsevierStylePara">De cada individuo se obtuvo una muestra de 10 ml de sangre periférica de la que se extrajo el ADN mediante precipitación salina<span class="elsevierStyleSup">15</span><span class="elsevierStyleItalic">. </span>Para el análisis genético se utilizaron cinco marcadores PKD1 (D16S521, KG8, AC2.5, CW2, SM7) y cuatro PKD2 (D4S1538, D4S1534, D4S423, D4S414), analizándose los nueve marcadores en todas las familias. Los marcadores fueron amplificados, utilizando cebadores descritos previamente<span class="elsevierStyleSup">16-18</span> mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en un volumen final de 15 µl, con 50 ng de DNA, MgCl<span class="elsevierStyleInf">2</span> 1.5 mM (0.5 mM para KG8), dNTPs 200 µM, 4 pmoles de cada cebador y 0.5 U de polimerasa EcoTaq (Ecogen, Barcelona, España). El protocolo de amplificación se llevó a cabo en un termociclador GeneAmp PCR System 9600 (Applied Biosystems, Foster City, EEUU), y consistió en una desnaturalización inicial a 94ºC durante 5 minutos, seguida de 25 ciclos de 30 segundos a 94ºC, 30 segundos a 58ºC y 30 segundos a 72ºC. Se realizó un paso de extensión final a 72ºC durante 20 minutos.</p><p class="elsevierStylePara">Los amplificados de los distintos marcadores fueron mezclados con el fin de obtener una sola muestra por paciente. A 1 µl de cada una de estas mezclas se añadieron 0.2 µl del marcador de peso molecular GeneScan-500-ROX (Applied Biosystems) y 20 µl de formamida desionizada. Las muestras así preparadas fueron desnaturalizadas a 95ºC durante 2 minutos y enfriadas rápidamente en hielo antes de ser analizadas por electroforesis capilar en un secuenciador ABI PRISM<span class="elsevierStyleSup">TM</span> 310 (Applied Biosystems).</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold"><span class="elsevierStyleItalic">Análisis de los resultados</span></span></p><p class="elsevierStylePara">Se calculó el porcentaje de individuos heterocigotos en una muestra de 74 individuos no relacionados, constituida por los cónyuges y un paciente por familia (caso índice). Este porcentaje es considerado como una de las medidas del grado de informatividad de marcadores polimórficos<span class="elsevierStyleSup">19</span>.</p><p class="elsevierStylePara">Para el análisis de ligamiento, de dos puntos, se utilizó el programa MLINK del paquete LINKAGE (PC DOS v5.2, Columbia University, Nueva York). En los cálculos del <span class="elsevierStyleItalic">lod score</span><span class="elsevierStyleSup">20</span><span class="elsevierStyleItalic"> </span>se consideró una frecuencia de 0.001 para PKD1 y 0.0001 para PKD2. Se definieron 3 clases de penetrancia, con valores de 0.64 (individuos <20 años), 0.92 (20-30 años) y 1 (>30 años) para PKD1, y valores de 0.50, 0.85 y 0.95, respectivamente, para PKD2<span class="elsevierStyleSup">21</span>. Para aumentar la potencia del análisis de ligamiento se definió un nuevo marcador consistente en el conjunto de los alelos de los distintos microsatélites en cada uno de los cromosomas (haplotipo). Mediante el análisis de los árboles genealógicos se identificó el haplotipo responsable de la transmisión de la enfermedad en cada familia (haplotipo transmisor). Se consideró como orden de los marcadores en los respectivos cromosomas el publicado en estudios anteriores<span class="elsevierStyleSup">16-18, 22, 23</span> y en la base de datos de la Fundación Jean Dausset-Centre d¿Etude du Polymorphisme Humain (http://www.cephb.fr). </p><p class="elsevierStylePara">Para la comparación de edades medias se utilizó el test de la t de Student.</p><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Resultados</span></p><p class="elsevierStylePara">De los 248 individuos a los que se realizó el análisis genético, 129 presentaban quistes cumpliendo los criterios ecográficos para ser considerados pacientes, y 115 fueron clasificados como sanos. Las edades medias de ambos grupos, la distribución de sexos y la clasificación genética se muestran en la tabla I. A cuatro individuos no se les pudo realizar la ecografía, por lo que no fueron incluidos en ninguno de los dos grupos. De ellos, dos no eran portadores del haplotipo transmisor, uno sí, y el último fue clasificado como indeterminado desde el punto de vista genético por falta de informatividad de los marcadores. De los pacientes, 13 son nuevos diagnósticos. </p><p class="elsevierStylePara">De las 30 familias analizadas, los haplotipos PKD1 fueron identificados con claridad en 29 de ellas, y en 28 familias en el caso de los haplotipos PKD2. En las familias en las que no pudo establecerse el haplotipo (familia nº13 para PKD1 y familias nº15 y 23 para PKD2), debido a la escasa informatividad de los marcadores y al pequeño tamaño de las familias en cuestión, no se realizó el análisis de ligamiento (tabla II). Veintiocho familias mostraron datos genéticos compatibles con el ligamiento a PKD1, y en una de ellas (nº15) se excluía dicho ligamiento. En la tabla II se muestra la distribución de pacientes e individuos sanos por familias y los valores de <span class="elsevierStyleItalic">lod score</span> obtenidos en el análisis de ligamiento para los marcadores PKD1 y PKD2. La sensibilidad y especificidad del análisis genético fueron del 90.7% (IC 95%: 85.7-95.7) y 86.8% (IC 95%: 80.6-93.0), respectivamente. </p><p class="elsevierStylePara">En las 21 familias con resultado claro de ligamiento a PKD1 (familias 1-8, 10-12, 19, 20, 22, 23 y 25-30) se encontraron 15 haplotipos transmisores distintos. Uno de los tres haplotipos que se repetían estaba presente en cuatro familias, otro en tres, y el tercero aparecía en dos familias. El número de haplotipos PKD1 no transmisores distintos fue de 110 de un total de 125. Se detectaron quince eventos de recombinación entre los marcadores PKD1, seis de los cuales implicaban al cromosoma identificado como transmisor. En el caso de los marcadores PKD2, se detectaron trece eventos de recombinación. El rango de tamaño de los alelos y los porcentajes de heterocigotos encontrados para cada marcador se muestran en la tabla III. </p><p class="elsevierStylePara">En cuanto a las características clínicas de los pacientes pertenecientes a las 21 familias con ligamiento a PKD1, la causa de diagnóstico más frecuente fue la historia familiar (tabla IV). No se observan diferencias significativas entre hombres y mujeres con respecto a la edad media al diagnóstico de la enfermedad, la hipertensión o el comienzo del tratamiento renal sustitutivo (TRS) (tabla V). El número de pacientes en TRS, así como la prevalencia de hipertensión y patología vásculo-cerebral, coronaria y vascular periférica se muestran en la tabla VI. </p>Discusión <p class="elsevierStylePara">La poliquistosis renal es la cuarta causa de insuficiencia renal crónica en Canarias, y representa el 8% del total de enfermos en diálisis en nuestra comunidad (Registro de Enfermos Renales, Sociedad Canaria de Nefrología, 2004). El análisis genético en familias con antecedentes de PQRAD es importante por varias razones. En primer lugar, hace posible el consejo genético. En segundo lugar, facilita el seguimiento preventivo de los individuos portadores del haplotipo transmisor. Y, por último, la exclusión inequívoca de la enfermedad en familiares de pacientes les permite vivir sin la incertidumbre de padecer la enfermedad en el futuro, y servir como donantes de riñón llegado el caso. </p><p class="elsevierStylePara">Los valores de sensibilidad y especificidad obtenidos (90.7 y 86.8%, respectivamente) confirman la validez del análisis genético con los marcadores escogidos para este estudio en nuestra población. La mayoría de los marcadores se encuentra en heterocigosis en un porcentaje de individuos que varía entre el 68.9 y el 78.4% (tabla III), rango considerado de alta informatividad<span class="elsevierStyleSup">24</span>. Sólo los marcadores KG8 y SM7 (PKD1) presentan porcentajes menores, que no suponen una gran desventaja para el análisis debido al empleo conjunto de los otros tres marcadores. Los porcentajes de individuos heterocigotos encontrados son similares a los de otros trabajos<span class="elsevierStyleSup">16,21</span> y a los publicados en la base de datos <span class="elsevierStyleItalic">Human Genome Database</span> (tabla III). Este grado de informatividad se traduce en una identificación inequívoca de los haplotipos PKD1 en un 96.7% de las familias de nuestro estudio, y de los PKD2 en un 93.3% de las mismas. Considerando los individuos, los datos genéticos fueron claramente interpretables (tabla I: genética (+), (¿) o recombinante) en un 97.7% de los pacientes, y en un 88.7% de los individuos sin quistes. </p><p class="elsevierStylePara">En el análisis de ligamiento de dos puntos, 18 de las familias obtuvieron un valor de <span class="elsevierStyleItalic">lod score</span> próximo o superior a 1 para PKD1 (tabla II). En la familia nº15, en la que el valor es mucho menor que ¿2.00, se excluye el ligamiento a PKD1. Este posible ligamiento a PKD2 no pudo ser confirmado por falta de informatividad de los marcadores. En el resto de los casos en los que el <span class="elsevierStyleItalic">lod score</span> es claramente inferior a 1 (valores £ 0.60), el ligamiento a PKD2 queda excluido en 3 de las familias (nº 12, 19 y 30). En las demás, los valores de <span class="elsevierStyleItalic">lod score</span> se encuentran en el rango de ¿1.02 a 0.58, tratándose de familias con 5 o menos miembros en la mayoría de los casos, en las que además los individuos con riesgo de haber heredado el haplotipo transmisor tienen menos de 30 años, lo que disminuye la potencia del análisis. Estas familias seguirán siendo objeto de seguimiento en los próximos años, procurando incorporar al estudio más miembros, con el fin de obtener resultados concluyentes en el diagnóstico genético.</p><p class="elsevierStylePara">Con respecto a las características clínicas de los pacientes PKD1 de nuestro estudio hay que señalar que la primera causa de diagnóstico de la enfermedad es la historia familiar, seguida de la HTA (tabla IV), al igual que se encontró en otros trabajos realizados en población española<span class="elsevierStyleSup">25, 26</span>. Las edades en el momento del diagnóstico de la enfermedad y la hipertensión, y el inicio del TRS de nuestros pacientes PKD1 (tabla V) son similares a las del estudio de Torra y cols.<span class="elsevierStyleSup">26</span>. Los porcentajes de pacientes en TRS y con hipertensión son, sin embargo, superiores en nuestro estudio (tabla VI), aunque estos datos podrían resultar modificados si se dispusiera de esta información en todos los casos.</p><p class="elsevierStylePara">Los resultados de este estudio no parecen apuntar hacia la existencia de un efecto fundador de las mutaciones PKD1 en nuestra población, como se ha podido observar en un trabajo realizado en las islas Seychelles<span class="elsevierStyleSup">27</span>, e incluso en población canaria en el caso de la hiperoxaluria primaria tipo 1<span class="elsevierStyleSup">28</span>, ya que sólo un pequeño número de haplotipos transmisores se repite en familias distintas. Sin embargo, para comprobar esto sería necesario hacer el análisis de mutaciones, ya que muchos de los haplotipos distintos difieren sólo en uno o dos marcadores, y podrían ser producto de una recombinación que conservara la mutación. Como se menciona en los resultados, se detectaron 6 haplotipos PKD1 transmisores recombinados, pero no se puede descartar la presencia de otros que no hayan podido ser detectados por haberse producido en una generación anterior a la primera estudiada. No obstante, hay que tener en cuenta que las Islas Canarias han recibido en los últimos cinco siglos un flujo continuo de población foránea de origen europeo y africano, principalmente, por lo que no se consideraría como una población aislada a pesar del carácter insular de su territorio.</p><p class="elsevierStylePara">Nuestro estudio no ha identificado a ningún portador del haplotipo transmisor asintomático (tabla I: sanos con genética (+)). Sin embargo, hay que tener en cuenta que en 13 individuos sin quistes los marcadores no mostraron informatividad suficiente como para clasificarlos inequívocamente como portadores o no portadores (genética indeterminada). De ellos, 4 tienen menos de 30 años, por lo que es posible que entre estos sujetos haya portadores que hubieran sido detectados si la informatividad de los marcadores en esas familias concretas hubiese sido mayor.</p><p class="elsevierStylePara">A la luz de los resultados de este y otros trabajos<span class="elsevierStyleSup">14</span>, la ecografía sigue mostrándose como una técnica muy sensible y asequible para el diagnóstico presintomático de la PQRAD. Dada la relativa poca utilidad del diagnóstico a edad temprana, debido a la falta de tratamiento en la actualidad, el análisis de ligamiento estaría indicado sobre todo cuando se demanda consejo genético. Sin embargo, esto podría cambiar en el futuro, gracias a los avances en el conocimiento de los mecanismos moleculares de la enfermedad y genes modificadores, que podrían llevar, si bien no a curarla, sí al desarrollo de fármacos que frenaran su progresión<span class="elsevierStyleSup">29, 30</span>.</p><p class="elsevierStylePara">En resumen, a pesar de sus limitaciones, derivadas de la necesidad de que participe en los estudios familiares un número suficiente de individuos afectos y sanos, de la edad de los individuos con diagnóstico ecográfico negativo y de la informatividad de los marcadores para cada familia concreta, el análisis de ligamiento con dos series de marcadores polimórficos localizados en las inmediaciones de los genes PKD1 y PKD2 se ha mostrado como una herramienta útil para el diagnóstico genético de la PQRAD en nuestra población. </p>Agradecimientos Agradecemos a las familias su participación en este estudio, a la Fundación Mapfre Guanarteme su apoyo económico para la realización del mismo, y a la Obra Social de La Caja de Canarias los fondos que permitieron la compra de un secuenciador de ADN para la Unidad de Investigación del Hospital Universitario de Gran Canaria Dr. Negrín. Agradecemos a Érika Hernández y Yaridé Hernández su colaboración en el laboratorio, y al Dr. Xosé Manuel Lens y su equipo (Hospital Clínico, Santiago de Compostela) y al Dr. Francisco Barros (Unidad de Medicina Molecular, Fundación Instituto Galego de Oftalmoloxía, Santiago de Compostela) su asesoramiento. <br></br><p class="elsevierStylePara"><span class="elsevierStyleBold">Bibliografía</span></p><li>Ceballos M, López-Revuelta K, Saracho R, García López F, Castro P, Gutiérrez JA, y cols. Informe de diálisis y trasplante correspondiente al año 2002 de la Sociedad Española de Nefrología y Registros Autonómicos. Nefrología XXV(2): 121-9, 2005. </li><li>Gabow PA. Autosomal dominant polycystic kidney disease. N Engl J Med 329(5): 332-42, 1993. </li><li>The European Polycystic Kidney Disease Consortium. The polycystic kidney disease 1 gene encodes a 14 kb transcript and lies within a duplicated region on chromosome 16. Cell 78(4): 725, 1994. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Peters DJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Peters DJ</a>M, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Spruit L%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Spruit L</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Saris JJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Saris JJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Ravine D%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Ravine D</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Sandkuijl LA%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Sandkuijl LA</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Fossdal R%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Fossdal R</a>, y cols. Chromosome 4 localization of a second gene for autosomal dominant polycystic kidney disease. Nat Genet 5(4): 359-62, 1993. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Kimberling WJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Kimberling WJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Kumar S%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Kumar S</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Gabow PA%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Gabow PA</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Kenyon JB%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Kenyon JB</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Connolly CJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Connolly CJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Somlo S%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Somlo S</a>. Autosomal dominant polycystic kidney disease: localization of the second gene to chromosome 4q13-q23. Genomics 18(3): 467-72, 1993. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Kimberling WJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Kimberling WJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Fain PR%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Fain PR</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Kenyon JB%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Kenyon JB</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Goldgar D%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Goldgar D</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Sujansky E%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Sujansky E</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Gabow PA%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Gabow PA</a>. Linkage heterogeneity of autosomal dominant polycystic kidney disease. N Engl J Med 319(14): 913-8, 1988. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Peters DJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Peters DJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Sandkuijl LA%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Sandkuijl LA</a>. Genetic heterogeneity of polycystic kidney disease in Europe. Contrib Nephrol 97: 128-39, 1992. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Qian F%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Qian F</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Germino FJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Germino FJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Cai Y%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Cai Y</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Zhang X%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Zhang X</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Somlo S%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Somlo S</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Germino GG%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Germino GG</a>. PKD1 interacts with PKD2 through a probable coiled-coil domain. Nat Genet 16(2): 179-83, 1997. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Hanaoka K%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Hanaoka K</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Qian F%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Qian F</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Boletta A%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Boletta A</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Bhunia AK%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Bhunia AK</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Piontek K%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Piontek K</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Tsiokas L%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Tsiokas L</a>, y cols. Co-assembly of polycystin-1 and -2 produces unique cation-permeable currents. Nature 408(6815): 990-4, 2000. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Barr MM%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Barr MM</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22DeModena J%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">DeModena J</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Braun D%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Braun D</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Nguyen CQ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Nguyen CQ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Hall DH%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Hall DH</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Sternberg PW%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Sternberg PW</a>. The <span class="elsevierStyleItalic">Caenorhabditis elegans</span> autosomal dominant polycystic kidney disease gene homologs lov-1 and pkd-2 act in the same pathway. Curr Biol 11(17): 1341-6, 2001. </li><li>Wilson PD. Polycystin: new aspects of structure, function, and regulation. J Am Soc Nephrol 12(4): 834-45, 2001. </li><li>Lens XM. Los nefrólogos y la poliquistosis renal. Nefrología XXII(5): 412-3, 2002.</li><p class="elsevierStylePara">13. <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Ravine D%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Ravine D</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Gibson RN%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Gibson RN</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Walker RG%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Walker RG</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Sheffield LJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Sheffield LJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Kincaid%2DSmith P%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Kincaid-Smith P</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Danks DM%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Danks DM</a>. Evaluation of ultrasonographic diagnostic criteria for autosomal dominant polycystic kidney disease 1. Lancet 343(8901): 824-7, 1994. </p><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Nicolau C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Nicolau C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Torra R%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Torra R</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Badenas C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Badenas C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Vilana R%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Vilana R</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Bianchi L%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Bianchi L</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Gilabert R%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Gilabert R</a>, y cols. Autosomal dominant polycystic kidney disease types 1 and 2: assessment of US sensitivity for diagnosis. Radiology 213(1): 273-6, 1999.</li><p class="elsevierStylePara">15. Miller SA, Dykes DD, Polesky HF. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic Acid Res 16:1215, 1988.</p><p class="elsevierStylePara">16. <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Peral B%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Peral B</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Ward CJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Ward CJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22San Millan JL%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">San Millan JL</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Thomas S%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Thomas S</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Stallings RL%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Stallings RL</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Moreno F%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Moreno F</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Harris PC%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Harris PC</a>. Evidence of linkage disequilibrium in the Spanish polycystic kidney disease I population. Am J Hum Genet 54(5): 899-908, 1994.</p><p class="elsevierStylePara">17. <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Coto E%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Coto E</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Sanz de Castro S%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Sanz de Castro S</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Aguado S%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Aguado S</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Alvarez J%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Alvarez J</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Arias M%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Arias M</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Menendez MJ%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Menendez MJ</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Lopez%2DLarrea C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Lopez-Larrea C</a>. DNA microsatellite analysis of families with autosomal dominant polycystic kidney disease types 1 and 2: evaluation of clinical heterogeneity between both forms of the disease. J Med Genet 32(6): 442-5, 1995.</p><p class="elsevierStylePara">18. <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22San Millan JL%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">San Millan JL</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Viribay M%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Viribay M</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Peral B%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Peral B</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Martinez I%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Martinez I</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Weissenbach J%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Weissenbach J</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Moreno F%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Moreno F</a>. Refining the localization of the PKD2 locus on chromosome 4q by linkage analysis in Spanish families with autosomal dominant polycystic kidney disease type 2. Am J Hum Genet 56(1): 248-53, 1995.</p><p class="elsevierStylePara">19. Elston RC. Linkage and association to genetic markers. Exp Clin Immunogenet 12(3): 129-40, 1995.</p><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Lathrop GM%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Lathrop GM</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&term=%22Lalouel JM%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Lalouel JM</a>. Easy calculations of lod scores and genetic risks on small computers. Am J Hum Genet 36(2): 460-5, 1984. </li><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Lee JG%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Lee JG</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Lee KB%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Lee KB</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Kim UK%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Kim UK</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Ahn C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Ahn C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Hwang DY%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Hwang DY</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Hwang YH%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Hwang YH</a>, y cols. Genetic heterogeneity in Korean families with autosomal-dominant polycystic kidney disease (ADPKD): the first Asian report. Clin Genet 60(2): 138-44, 2001.</li><p class="elsevierStylePara">22. <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Torra R%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Torra R</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Badenas C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Badenas C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Darnell A%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Darnell A</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Nicolau C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Nicolau C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Volpini V%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Volpini V</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Revert L%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Revert L</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Estivill X%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Estivill X</a>. Linkage, clinical features, and prognosis of autosomal dominant polycystic kidney disease types 1 and 2. J Am Soc Nephrol 7(10): 2142-51, 1996.</p><p class="elsevierStylePara">23. <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Deltas CC%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Deltas CC</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Christodoulou K%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Christodoulou K</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Tjakouri C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Tjakouri C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Pierides A%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Pierides A</a>. Presymptomatic molecular diagnosis of autosomal dominant polycystic kidney disease using PKD1- and PKD2-linked markers in Cypriot families. Clin Genet 50(1): 10-8, 1996.</p><li><a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Dib C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Dib C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Faure S%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Faure S</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Fizames C%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Fizames C</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Samson D%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Samson D</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Drouot N%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Drouot N</a>, <a title="Click to search for citations by this author." href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=pubmed&cmd=Search&itool=pubmed_Abstract&term=%22Vignal A%22%5BAuthor%5D" class="elsevierStyleCrossRefs">Vignal A</a>, y cols. A comprehensive genetic map of the human genome based on 5,264 microsatellites. Nature 380(6570): 152-4, 1996. </li><li>Aguado S. Diagnóstico convencional y genético en la poliquistosis renal autosómica dominante (PQRAD). Implicaciones sobre el consejo genético. Nefrología XV(Supl. 1): 11-4, 1995. </li><li>Torra R, Badenas C, Darnell A, Nicolau C, Volpini V, Revert L, Estivill X. Estudio clínico, genético y molecular de la poliquistosis renal autosómica dominante tipos 1 y 2. Med Clin (Barc) 110: 481-7, 1998. </li><li>Yersin C, Bovet P, Wauters JP, Schorderet DF, Pescia G, Paccaud F. Frequency and impact of autosomal dominant polycystic kidney disease in the Seychelles (Indian Ocean). Nephrol Dial Transplant 12:2069-74, 1997. </li><li>Santana A, Salido E, Torres A, Shapiro LJ. Primary hyperoxaluria type 1 in the Canary Islands: a conformational disease due to I244T mutation in the P11L-containing alanine glyoxylate aminotransferase. Proc Natl Acad Sci USA 100(12):7277-82, 2003. </li><li>Coto E. Genómica, farmacogenómica y medicina en el siglo XXI. Nefrología XX(3): 209-13, 2000. </li><li>Torres VE. Therapies to slow polycystic kidney disease. Nephron Exp Nephrol 98(1):1-7, 2004.</li>   " "pdfFichero" => "P1-E255-S132-A4110.pdf" "tienePdf" => true "tieneResumen" => true "resumen" => array:1 [ "en" => array:1 [ "resumen" => "La poliquistosis renal autosómica dominante es una enfermedad hereditaria responsable del 6% de los casos de insuficiencia renal terminal en España. En la década de los 90 se identificaron los dos únicos genes relacionados con la enfermedad hasta el momento, en los cromosomas 16 y 4 (PKD1 y PKD2). El diagnóstico de esta enfermedad de desarrollo dependiente de la edad puede realizarse fácilmente mediante ecografía, pero el diagnóstico molecular mediante el análisis de ligamiento ofrece la ventaja de la detección precoz de individuos asintomáticos portadores del defecto genético, con vistas al seguimiento preventivo de estos individuos y al consejo genético. En este trabajo presentamos los resultados del análisis molecular de 30 familias con poliquistosis renal de la provincia de Las Palmas, realizado mediante análisis de ligamiento con dos series de marcadores polimórficos localizados en las inmediaciones de los genes PKD1 (D16S521, KG8, AC2.5, CW2, SM7) y PKD2 (D4S1538, D4S1534, D4S423, D4S414). Los objetivos del trabajo fueron: primero, comprobar el grado de informatividad y, por tanto, la utilidad de estos microsatélites para los estudios familiares de la PQRAD en nuestra población; y segundo, determinar la sensibilidad y especificidad del análisis genético en nuestra población. La mayoría de los marcadores mostró una alta heterocigosidad, comparable a la de otros estudios. Considerar los alelos de los distintos marcadores presentes en un mismo cromosoma conjuntamente, como un haplotipo, aumentó la informatividad de los marcadores y permitió la identificación inequívoca de los datos genéticos en el 97.7% de los pacientes y en el 88.7% de los individuos sanos. La sensibilidad y especificidad del análisis genético fueron del 90.7% (IC 95%: 85.7-95.7) y 86.8% (IC 95%: 80.6-93.0), respectivamente. Summary Adult Dominant Polycystic Kidney Disease is an hereditary condition responsible for 6% of end-stage renal failure in Spain. Two genes were localized in chromosomes 16 and 4 as related to this age-dependent disease in the 90s (PKD1 and PKD2). The diagnosis can be easily achieved by sonographic study, but molecular analysis by means of linkage analysis has the advantage of an early diagnosis in asymptomatic genetic carriers, with a view to the preventive follow-up of these subjects and genetic counselling. In this paper we present the results of molecular analysis of 30 families with Adult Dominant Polycystic Kidney Disease (all from the province of Las Palmas, Spain), undertaken by linkage analysis with two series of microsatellite markers located within or in the vicinity of PKD1 (D16S521, KG8, AC2.5, CW2, SM7) and PKD2 (D4S1538, D4S1534, D4S423, D4S414) genes. The objectives of the study were: first, to verify the informativeness, and therefore, the usefulness of these markers for family studies in our population; and second, to assess the sensitivity and specificity of the genetic analysis in our population. Most of the markers showed a high heterozigosity, comparable to data in other studies. Considering the alleles of the different markers together in a chromosome as an haplotype increased the informativeness of the markers, and allowed the unequivocal identification of genetic data in 97.7% of patients and 88.7% of healthy subjects. The sensitivity and specificity of the genetic analysis were 90.7% (CI 95%=85.7-95.7) and 86.8% (CI 95%=80.6-93.0), respectively. " ] ] ] "idiomaDefecto" => "es" "url" => "/02116995/0000002600000006/v0_201502091327/X0211699506020582/v0_201502091328/es/main.assets" "Apartado" => array:4 [ "identificador" => "35393" "tipo" => "SECCION" "es" => array:2 [ "titulo" => "Artículos Originales" "idiomaDefecto" => true ] "idiomaDefecto" => "es" ] "PDF" => "https://static.elsevier.es/multimedia/02116995/0000002600000006/v0_201502091327/X0211699506020582/v0_201502091328/es/P1-E255-S132-A4110.pdf?idApp=UINPBA000064&text.app=https://revistanefrologia.com/" "EPUB" => "https://multimedia.elsevier.es/PublicationsMultimediaV1/item/epub/X0211699506020582?idApp=UINPBA000064" ]
| año/Mes | Html | Total | |
|---|---|---|---|
| 2024 Noviembre | 11 | 12 | 23 |
| 2024 Octubre | 89 | 48 | 137 |
| 2024 Septiembre | 77 | 31 | 108 |
| 2024 Agosto | 79 | 57 | 136 |
| 2024 Julio | 60 | 33 | 93 |
| 2024 Junio | 67 | 23 | 90 |
| 2024 Mayo | 108 | 44 | 152 |
| 2024 Abril | 78 | 27 | 105 |
| 2024 Marzo | 48 | 15 | 63 |
| 2024 Febrero | 39 | 25 | 64 |
| 2024 Enero | 43 | 29 | 72 |
| 2023 Diciembre | 30 | 20 | 50 |
| 2023 Noviembre | 63 | 25 | 88 |
| 2023 Octubre | 44 | 25 | 69 |
| 2023 Septiembre | 52 | 28 | 80 |
| 2023 Agosto | 58 | 21 | 79 |
| 2023 Julio | 51 | 23 | 74 |
| 2023 Junio | 54 | 28 | 82 |
| 2023 Mayo | 45 | 31 | 76 |
| 2023 Abril | 37 | 24 | 61 |
| 2023 Marzo | 48 | 22 | 70 |
| 2023 Febrero | 36 | 30 | 66 |
| 2023 Enero | 49 | 25 | 74 |
| 2022 Diciembre | 33 | 33 | 66 |
| 2022 Noviembre | 57 | 34 | 91 |
| 2022 Octubre | 67 | 45 | 112 |
| 2022 Septiembre | 39 | 34 | 73 |
| 2022 Agosto | 38 | 41 | 79 |
| 2022 Julio | 55 | 80 | 135 |
| 2022 Junio | 60 | 46 | 106 |
| 2022 Mayo | 75 | 37 | 112 |
| 2022 Abril | 66 | 51 | 117 |
| 2022 Marzo | 62 | 60 | 122 |
| 2022 Febrero | 49 | 44 | 93 |
| 2022 Enero | 37 | 35 | 72 |
| 2021 Diciembre | 50 | 41 | 91 |
| 2021 Noviembre | 51 | 36 | 87 |
| 2021 Octubre | 59 | 36 | 95 |
| 2021 Septiembre | 52 | 47 | 99 |
| 2021 Agosto | 36 | 35 | 71 |
| 2021 Julio | 20 | 32 | 52 |
| 2021 Junio | 47 | 27 | 74 |
| 2021 Mayo | 30 | 27 | 57 |
| 2021 Abril | 49 | 61 | 110 |
| 2021 Marzo | 54 | 18 | 72 |
| 2021 Febrero | 32 | 15 | 47 |
| 2021 Enero | 29 | 23 | 52 |
| 2020 Diciembre | 25 | 17 | 42 |
| 2020 Noviembre | 31 | 16 | 47 |
| 2020 Octubre | 28 | 20 | 48 |
| 2020 Septiembre | 22 | 3 | 25 |
| 2020 Agosto | 70 | 32 | 102 |
| 2020 Julio | 44 | 11 | 55 |
| 2020 Junio | 46 | 13 | 59 |
| 2020 Mayo | 56 | 21 | 77 |
| 2020 Abril | 37 | 19 | 56 |
| 2020 Marzo | 38 | 16 | 54 |
| 2020 Febrero | 49 | 26 | 75 |
| 2020 Enero | 49 | 26 | 75 |
| 2019 Diciembre | 32 | 9 | 41 |
| 2019 Noviembre | 49 | 12 | 61 |
| 2019 Octubre | 53 | 21 | 74 |
| 2019 Septiembre | 53 | 16 | 69 |
| 2019 Agosto | 33 | 18 | 51 |
| 2019 Julio | 33 | 22 | 55 |
| 2019 Junio | 32 | 11 | 43 |
| 2019 Mayo | 62 | 26 | 88 |
| 2019 Abril | 72 | 38 | 110 |
| 2019 Marzo | 31 | 22 | 53 |
| 2019 Febrero | 24 | 21 | 45 |
| 2019 Enero | 25 | 19 | 44 |
| 2018 Diciembre | 62 | 62 | 124 |
| 2018 Noviembre | 51 | 20 | 71 |
| 2018 Octubre | 47 | 17 | 64 |
| 2018 Septiembre | 33 | 15 | 48 |
| 2018 Agosto | 33 | 16 | 49 |
| 2018 Julio | 33 | 15 | 48 |
| 2018 Junio | 34 | 6 | 40 |
| 2018 Mayo | 60 | 18 | 78 |
| 2018 Abril | 47 | 9 | 56 |
| 2018 Marzo | 52 | 8 | 60 |
| 2018 Febrero | 44 | 4 | 48 |
| 2018 Enero | 44 | 12 | 56 |
| 2017 Diciembre | 91 | 8 | 99 |
| 2017 Noviembre | 72 | 11 | 83 |
| 2017 Octubre | 61 | 7 | 68 |
| 2017 Septiembre | 44 | 8 | 52 |
| 2017 Agosto | 49 | 6 | 55 |
| 2017 Julio | 36 | 9 | 45 |
| 2017 Junio | 44 | 23 | 67 |
| 2017 Mayo | 57 | 9 | 66 |
| 2017 Abril | 75 | 10 | 85 |
| 2017 Marzo | 56 | 21 | 77 |
| 2017 Febrero | 28 | 11 | 39 |
| 2017 Enero | 35 | 12 | 47 |
| 2016 Diciembre | 88 | 12 | 100 |
| 2016 Noviembre | 92 | 13 | 105 |
| 2016 Octubre | 108 | 23 | 131 |
| 2016 Septiembre | 166 | 18 | 184 |
| 2016 Agosto | 262 | 4 | 266 |
| 2016 Julio | 236 | 5 | 241 |
| 2016 Junio | 172 | 0 | 172 |
| 2016 Mayo | 156 | 0 | 156 |
| 2016 Abril | 122 | 0 | 122 |
| 2016 Marzo | 104 | 0 | 104 |
| 2016 Febrero | 131 | 0 | 131 |
| 2016 Enero | 123 | 0 | 123 |
| 2015 Diciembre | 129 | 0 | 129 |
| 2015 Noviembre | 117 | 0 | 117 |
| 2015 Octubre | 116 | 0 | 116 |
| 2015 Septiembre | 109 | 0 | 109 |
| 2015 Agosto | 147 | 0 | 147 |
| 2015 Julio | 105 | 0 | 105 |
| 2015 Junio | 70 | 0 | 70 |
| 2015 Mayo | 92 | 0 | 92 |
| 2015 Abril | 12 | 0 | 12 |
| 2015 Febrero | 732 | 0 | 732 |
Mostrar todo
